气相色谱仪测定肉制品中吡菌磷残留量的方法

气相色谱仪测定肉制品中吡菌磷残留量的方法原理：

样品采用环己烷-乙酸乙酯(1+1，体积比)均质提取，提取液用凝胶渗透色谱净化，浓缩定容后用气相色谱仪测量，外标定量。

1.凝胶净化提取物：

取环己烷-乙酸乙酯混合溶剂(1+1) 100 mL 加入环己烷 100 mL 乙酸乙酯，摇匀备用。

2.标准产品:吡菌磷标准物质:纯度:≥97%。

3.标准溶液制备：

1)吡菌磷标准储备溶液:准确称取适量吡菌磷标准物质(精确至 0.1 mg），甲苯浓度约为 1.0 mg/mL 标准储备液。

2)吡菌磷标准工作溶液:根据检测要求，用正己烷稀释上述标准储备稀释成适当浓度的标准工作溶液

1.气相色谱仪：配备火焰光度检测器（FPD），带磷滤光片。

2.凝胶渗透色谱仪。

分析天平：感觉 0.01 g 和 0.0001 g。

4、离心机。

5.旋转蒸发器。

6.氮气吹干机。

7、均质器。

1、提取：

称取10 g样品(精确到0.01 g）于盛有20 g100无水硫酸钠 mL在离心管中，加入30 mL环己烷-乙酸乙酯混合溶剂，均质器为15 000 r/min均质提取1.5 min后，在3 000 r/min离心3 min。上清液通过装有无水硫酸钠的筒上清液100 mL梨形瓶中。残渣用30 mL同上提取环己烷-乙酸乙酯混合溶剂，合并两次提取物，用少量环己烷-乙酸乙酯混合溶剂清洗无水硫酸钠柱。将提取液于40℃水浴旋 转蒸发至约2 mL，待净化。

2.凝胶色谱净化:

1)凝胶渗透色谱仪的色谱条件:

a）净化柱：400 mm×25 mm，内装 BIO-Beads S-X3 填料或相等。

b）流相：环己烷-乙酸乙酯(1+1，体积比)。

c）流速：5 mL/min。

d）进样量：5 mL。

e）开始收集时间：1 200 s。

f）收集时间结束：1 800 s。

2)净化步骤：

将浓缩提取物转移到10 mL在刻度离心试管中，用环己烷-乙酸乙酯混合溶剂多次洗涤梨形瓶，合并洗液，定容至刻度。在4 000 r/min离心5 min之后，上清液用0.45 μm有机相滤膜滤入凝胶渗透色谱仪进样瓶中。用凝胶渗透色谱仪净化，收集1 200 s～1 800 s的流出液。用氮气吹干机吹干流出液，加1.0 mL正己烷溶解、混合、供气相色谱仪测定。

3.气相色谱仪测定:

1)气相色谱仪的色谱条件:

a）色谱柱：HP-5，30 m×0.32 mm（i.d.），膜厚 0.25 μm，或相当者。

b）色谱柱温度：初始温度 220℃，保持 10 min；以 10℃/min 的速率升至 250℃，保持 7 min。

c）载气（N2）：1.5 mL/min。

d）氢气（H2）：75 mL/min。

e）空气：100 mL/min。

f）检测器温度：280℃。

g）进口温度：250℃。

h）进样体积：1 µL。

i）进样方式：无分流进样，1.5 min 然后打开分流阀。

2)色谱测定：

根据样品中吡菌磷的含量，选择适当浓度的标准工作溶液和待测样品。标准工作液和待测样品中吡菌磷的响应值应在仪器响应线性范围内。在上述色谱条件下，吡菌磷的保留时间约为14.9 min，根据峰面积外标法定量。